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離心機(jī)在耐銅酵母的馴化中的作用

導(dǎo)讀:隨著畜牧業(yè)的不斷發(fā)展，對(duì)飼料的要求也越來越高。新型飼料不僅要營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高還要成本低，環(huán)境污染小。生物發(fā)酵料是目前畜牧業(yè)能同時(shí)滿足高營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和低成本要求的重要研究方向

來源：未知發(fā)布日期：2019-11-26 15:04【大中小】

隨著畜牧業(yè)的不斷發(fā)展，對(duì)飼料的要求也越來越高。新型飼料不僅要營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高還要成本低，環(huán)境污染小。生物發(fā)酵料是目前畜牧業(yè)能同時(shí)滿足高營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和低成本要求的重要研究方向之一。本文上海安亭科學(xué)儀器廠主要探究常溫、偏酸條件下，酵母對(duì)銅的富集能力，尋找此條件下對(duì)銅具有高富集能力的酵母菌株，并通過馴化獲得富銅能力較高的菌株，為富銅生物發(fā)酵料的研發(fā)提供更多的選擇性。

1.儀器
SMART生物顯微鏡（重慶奧特光學(xué)儀器有限公司），培英THZ-C恒溫震蕩器（蘇州培英實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司），離心機(jī)（上海安亭科學(xué)儀器廠），立式滅菌鍋D2S2-LC100（山東新華醫(yī)療器械股份有限公司），電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱（上海躍進(jìn)醫(yī)療器械有限公司），血球計(jì)數(shù)板（上海市求精生化試劑儀器有限公司），電感耦合等離子體發(fā)射光譜。

2耐銅酵母菌最適銅濃度的篩選
將培養(yǎng)24h的耐銅酵母菌菌種1mL接種到50mL硫酸銅添加量分別為100，200，300，400mg.L-1的培養(yǎng)基中，接種后立即取2mL培養(yǎng)基保存于4℃下備用，再置于28～30℃恒溫?fù)u床，150r.min-1震蕩培養(yǎng)，培養(yǎng)72h后取出，再將培養(yǎng)液在4000r.min-1離心5min，收集2mL上清液保存于4℃?zhèn)溆?，用上海安亭離心機(jī)離心得到的菌體用雙蒸水沖洗，再離心，如此反復(fù)3次，在65℃將菌體干燥，備用。檢測(cè)起始培養(yǎng)基銅濃度，上清液銅濃度，酵母菌粉含銅量。用電感耦合等離子體發(fā)射光譜測(cè)銅的含量。耐銅酵母對(duì)銅的吸附量=起始培養(yǎng)基銅濃度-上清液銅濃度。根據(jù)檢測(cè)結(jié)果，確定耐銅酵母的最適生長(zhǎng)銅濃度。

3富銅酵母產(chǎn)品的銅含量
將耐銅酵母菌啤酒酵母336058接種于銅濃度為200mg.L-1，pH值（6.2±0.2）的培養(yǎng)液中，置于溫度為28~30℃的培養(yǎng)箱中，150r.min-1震蕩培養(yǎng)72h，將培養(yǎng)液在4000r.min-1離心5min，用上海安亭離心機(jī)離心得到的菌體用雙蒸水沖洗，再離心，如此反復(fù)3次，在65℃將菌體干燥，根據(jù)電感耦合等離子體發(fā)射光譜的檢測(cè)結(jié)果，獲得富銅酵母菌體銅含量為14.97g.kg-1。本研究上海安亭科學(xué)儀器廠在溫度為28～30℃，pH值（6.2±0.2）的條件下，獲得了菌體含銅量為14.97g.kg-1的活性富銅酵母菌株，該富銅酵母可作為銅元素的添加劑為動(dòng)物生產(chǎn)提供有機(jī)銅，同時(shí)為下一步富銅生物發(fā)酵料的研發(fā)提供菌株基礎(chǔ)。本富銅酵母菌培養(yǎng)條件簡(jiǎn)單，成本低，可降低生物發(fā)酵料的生產(chǎn)和研發(fā)的用菌成本，有利于畜牧業(yè)發(fā)酵飼料的發(fā)展。

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