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離心技術分離穩(wěn)定DNA的方法研究

導讀:超速離心機是分子生物實驗室最常用的科研儀器之一，能將具有不同沉降系數(shù)、質量和密度的混合物在離心機高速旋轉產生的離心力場作用下進行快速分離、濃縮和純化。密度梯度區(qū)帶


返回列表 來源：未知 發(fā)布日期：2020-03-11 11:05【大 中 小】
超速離心機是分子生物實驗室最常用的科研儀器之一，能將具有不同沉降系數(shù)、質量和密度的混合物在離心機高速旋轉產生的離心力場作用下進行快速分離、濃縮和純化。密度梯度區(qū)帶離心法(簡稱區(qū)帶離心法)，是超速離心機常用的一種離心方法，在一定的離心力下將加入惰性梯度介質的樣品進行離心沉降，把所需的顆粒分配到梯度中某些特定位置，形成不同區(qū)帶的分離方法。該法能夠在保持顆?；钚詶l件下很好地將不同顆粒的物質進行分離。

密度梯度離心技術是實現(xiàn) SIP-DNA 樣品分離的關鍵技術，本研究通過實驗獲得了超速離心機分離SIP-DNA樣品的最佳條件（以CsCl為惰性介質，在20℃，45000g離心48小時，離心后分為14層）。根據(jù)每層的浮力密度和DNA濃度這兩個參數(shù)可以判定分離是否成功，成功分離后的重的同位素樣品與正常樣品相比不僅相同層數(shù)浮力密度大，在相同浮力密度層DNA濃度最大位置也會比較靠后。

該技術可為后續(xù)16SrRNA高通量測序提供前提和保障。根據(jù)高通量數(shù)據(jù)結果可以從整體水平上反應環(huán)境樣品微生物群落水平，也可以更準確的認識自然條件下微生物的作用與具體的功能微生物。

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